Проницаемость клеток для воды
Клетки содержат большое количество воды. В животных клетках ее около 80%, а в некоторых растительных клетках, имеющих большую центральную вакуоль, количество воды может достигать 95% и выше. Однако в протоплазме этих клеток содержание воды примерно такое же, как и в животных клетках.
В каком состоянии находится вода в живых клетках, отличается ли она по своим свойствам от воды в сосуде, так называемой объемной воды? Единого мнения по этому поводу не существует.
Со времен исследования Е. Овертона (1902) возникло представление о наличии в клетках связанной воды, которая не растворяет вещества и не подвергается действию осмотических сил. Овертон полагал, что связанная вода составляет 35% от всей воды в клетке. Он работал на мышцах, изучая проницаемость различных веществ с помощью осмотического метода, и обнаружил отклонение от осмотической закономерности: мышцы теряли воды в гипертонических растворах меньше, чем следовало. Но если допустить, что 35% воды не растворяет, т.е. является связанной, то получалось хорошее соответствие с осмотической закономерностью.
Некоторые исследователи пониженную растворяющую способность клеточной воды объясняют не ее особыми свойствами, а тем, что какая-то часть ее находится в местах, недоступных для более крупных молекул, поэтому они в ней и не растворяются (гипотезы ограниченных недоступных пространств). Наоборот, другие исследователи полагали, что в протоплазме вообще нет свободной воды, что она вся связана, т.е. что она отличается от объемной воды, хуже растворяет и не смешивается с ней.
На основании физико-химических исследований известно, что структура воды изменяется вблизи поверхностей раздела фаз, в капиллярах, вокруг молекул с большой молекулярной массой. Силовое поле поверхности вызывает более упорядоченную структуру воды. При этом изменения не ограничиваются мономолекулярным слоем, а распространяются на расстоянии 5—10 нм и даже на 150 нм. Вода эта по сравнению с более удаленной от поверхности обладает иной плотностью, иной растворяющей способностью, иной вязкостью и повышенной теплопроводностью. Клетка же состоит из огромных молекул биополимеров и пространственно представляет собой чрезвычайно сложно организованную структуру с очень большой поверхностью.
Наличие в клетке электрических зарядов — ионов — также должно влиять на состояние воды, так как известно, что ионы К+, NH4+, Rb+, Cs+, Cl—, I— повышают подвижность молекул воды, разжижают ее структуру и молекулы воды вблизи этих ионов приобретают большую подвижность. Указанные ионы обладают отрицательной гидратацией.
Ионы Na+, Li, Ca2+, Ba2+, Mg2+, Al3+, OH—, F— обладают положительной гидратацией, они замедляют подвижность молекул, и можно говорить о некотором эффективном связывании ионами ближайших молекул воды.
В настоящее время пытаются экспериментально решить вопрос о состоянии воды в клетках с привлечением различных физико-химических методов — рентгеноструктурного анализа, инфракрасной спектроскопии, ядерного магнитного резонанса, колориметрического, различных оптических и др. К сожалению, ввиду очень сложного объекта, каковым является клетка, невозможно однозначно интерпретировать полученные данные. В большинстве работ указывается на существование нескольких фракций воды, разной степени упорядоченности.
Таким образом, вопрос о состоянии воды в клетке еще не решен. Не лучше обстоит дело и со структурой объемной воды— существует также много теорий ее строения.
В норме количество воды в клетках поддерживается с большим постоянством, возможны небольшие сезонные колебания. Но если значительно изменяется функциональное состояние клетки, то изменяется и количество в ней воды. Так, при различных повреждениях, при действии ферментных ядов, низкой температуры и других факторов клетки поглощают воду и набухают. Изменение ферментативной активности в митохондриях сопровождается их набуханием или отбуханием.
Все клетки хорошо проницаемы для воды, скорость проникновения ее значительно выше, чем других веществ (кроме газов), например в 50 раз выше скорости глицерина и в 30—40 раз — мочевины. О проницаемости воды чаще всего судят по скорости изменения объема клетки в гипо- или гипертонических растворах веществ, не проникающих или плохо проникающих в клетки, т.е. по скорости отбухания или набухания. В таблице 3 приведены величины коэффициентов проницаемости воды для различных клеток.
| Таблица 3. Проницаемость клеток для воды по данным осмотических опытов | |
| Объект | Проницаемость (мкм3) за 1 мин через 1 мкм2поверхности при разности осмотического давления внутри и снаружи клетки, равной 0,1 МПа |
| Простейшие | |
| Одноядерная амеба | 0,026—0,031 |
| Грегарина | 0,2 |
| Неоплодотворенные яйца морских животных | |
| Морской еж | 0,10—0,17 |
| Морская звезда | 0,60—0,70 |
| Клетки растений | |
| Фукус (бурая водоросль) | 0,13-0,19 |
| Лук репчатый | 0,35 |
| Майник двулистный | 0,06—0,38 |
| Клетки млекопитающих | |
| Лейкоциты кролика | 0,3 |
| Лейкоциты человека | 1,3 |
| Эритроциты человека | 3,0 |
Как видно из приведенных данных, они отличаются друг от друга в десятки и сотни раз.
Проницаемость клеток для воды изучается и с помощью изотопного метода с использованием либо тяжелой дейтериевой воды (D2O), либо радиоактивной тритиевой (T2O) без нарушения осмотического равновесия. Этот метод показал, что все время происходит обмен воды между клеткой и средой. Если кролику ввести в кровяное русло тяжелую воду, то уже через 30—40 мин она полностью перемешивается с водой скелетной мышцы. Вода протоплазмы амебы обменивается на тяжелую воду за 14 мин; у аксона кальмара время полуобмена воды аксоплазмы лежит в пределах 40с.
Скорость движения воды в клетку или из клетки по осмотическому градиенту, определяемая по скорости изменения объема клетки, больше, чем при диффузионном обмене, обнаруживаемом изотопной методикой при постоянном объеме клетки (табл. 4).
| Таблица 4. Величина проницаемости воды у некоторых клеток, определяемая разными методиками (Harris, 1960) | |||
| Клетки | Проницаемость, мкм/с—1 | ||
| осмотический метод | изотопный метод | ||
| Амеба | 0,37 | 0,23 | |
| Яйцеклетка лягушки | 1,30 | 0,75 | |
| Эритроциты человека | 139,0 | 58 | |
| Эритроциты быка | 152,0 | 51 | |
| Эритроциты собаки | 400,0 | 63 | |
Каковы механизмы движения воды?
Это пассивный перенос по осмотическому градиенту. Ни у одного животного пока не найдено образования, способного к активной секреции воды и к транспорту молекул воды против осмотического градиента. У некоторых одноклеточных, живущих в пресной воде, избыток поступающей по осмотическому градиенту в организм воды непрерывно удаляется с помощью особого органоида — пульсирующей вакуоли. Благодаря этому осмотическое давление внутри клетки постоянно поддерживается на более высоком уровне по сравнению с давлением среды. Это активный процесс, протекающий с затратой энергии, но механизм его еще неизвестен.
Почти у всех пресноводных и наземных растений, имеющих клетки с твердыми оболочками из клетчатки, концентрация содержимого клеток больше концентрации тканевых жидкостей. Поэтому вода стремится внутрь клетки и обусловливает тургор, играющий для жизни растений важную роль (удержание воды, расправление листьев и побегов, рост). У растений пустынь разница осмотических давлений содержимого клетки и окружающей жидкости достигает иногда 5 МПа.
У животных клеток стенки эластичные и концентрация внутри и вне клеточной жидкости обычно изоосмотичная. Постоянство осмотического давления тканевой жидкости и плазмы крови поддерживается с помощью специальных систем организма.
